La nanoscopía de fluorescencia de campo lejano es una familia de métodos que ha revolucionado la visualización de sistemas biológicos porque proporcionan una resolución espacial de sub-difracción, manteniendo al mismo tiempo la baja invasividad de la interrogación con luz visible. Haciendo uso de transiciones moleculares que “prendan” y “apaguen” la emisión molecular, estos métodos rompen cualquier limitación fundamental a la resolución espacial alcanzable. En la práctica, sin embargo, la resolución está limitada por el número total de ciclos de excitación-emisión o ciclos de encendido y
apagado que una molécula puede realizar o soportar. Bajo condiciones biológicas, la resolución lateral se limita típicamente a unos 20 - 50 nm. La resolución axial es típicamente peor, en el rango de 60 - 120 nm. La resolución de las estructuras de proteínas supramoleculares, así como la organización espacial de las interacciones proteína-proteína, requiere otro empujón a la resolución para entrar en el régimen de
sub-10 nm, que es el tamaño típico de las proteínas y complejos estructurales.
Aquí se presentan tres avances recientes de nuestro laboratorio que permiten la obtención de imágenes biológicas con una resolución por debajo de los 10 nm. En primer lugar, se describirá una nueva y más simple implementación de MINFLUX 1 . En segundo lugar, se mostrará una combinación exitosa de STED-FRET, que es capaz de súper resolver las interacciones biomoleculares directas. Finalmente, se presentará una nanoscopia TIRF basada en DNA-PAINT que puede entregar menos de 10 nm en tres dimensiones, y que puede ser implementada en cualquier microscopio de fluorescencia de molécula única de campo amplio.
(1) Balzarotti, F. et al. Science 355 (2017) 606–612.
En 2017, la revista Physics World consideró la investigación en microscopios de fluorescencia del Dr. Stefani como uno de los diez mayores avances del año para la física. Stefani presentó una nueva metodología que permite superar el límite de visualización que existía en los microscopios de fluorescencia y lograr una resolución inédita.
Dia: MIERCOLES 8 DE MAYO
Hora: 12 HS.
Lugar: AUDITORIO DEL IAL
